誰(shuí)知道革蘭染色發(fā)明的歷史小故事？
革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫(yī)師、細(xì)菌學(xué)家 Christain Gram創(chuàng)立。
細(xì)菌先經(jīng)堿性染料結(jié)晶染色，而經(jīng)碘液媒染后，用酒精脫色，在一定條件下有的細(xì)菌此色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細(xì)菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽(yáng)性菌（G+），后者為革蘭氏陰性菌（G—）。為觀察方便，脫色后再用一種紅色染料如堿性蕃紅等進(jìn)行復(fù)染。陽(yáng)性菌仍帶紫色，陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數(shù)和球菌，以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應(yīng)；弧菌，螺旋體和大多數(shù)致病性的無(wú)芽胞桿菌都呈現(xiàn)負(fù)反應(yīng)。革蘭氏陽(yáng)性菌對(duì)青霉素敏感，革蘭氏陰性菌對(duì)鏈霉素敏感?？筛鶕?jù)革蘭氏染色法鑒別不同菌種并對(duì)癥下藥。
革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌在化學(xué)組成和生理性質(zhì)上有很多差別，染色反應(yīng)不一樣?，F(xiàn)在一般認(rèn)為革蘭氏陽(yáng)性菌體內(nèi)含有特殊的核蛋白質(zhì)鎂鹽與多糖的復(fù)合物，它與碘和結(jié)晶紫的復(fù)合物結(jié)合很牢，不易脫色，陰性菌復(fù)合物結(jié)合程度底，吸附染料差，易脫色，這是染色反應(yīng)的主要依據(jù)。 另外，陽(yáng)性菌菌體等電點(diǎn)較陰性菌為低，在相同PH條件下進(jìn)行染色，陽(yáng)性菌吸附堿性染料很多，因此不易脫去，陰性菌則相反。所以染色時(shí)的條件要嚴(yán)格控制。例如，在強(qiáng)堿的條件下進(jìn)行染色，兩類菌吸附堿性染料都多，都可呈正反應(yīng)；PH很低時(shí)，則可都呈負(fù)反應(yīng)。此外，兩類菌的細(xì)胞壁等對(duì)結(jié)晶紫—碘復(fù)合物的通透性也不一致，陽(yáng)性菌透性小，故不易被脫色，陰性菌透性大，易脫色。所以脫色時(shí)間，脫色方法也應(yīng)嚴(yán)格控制。
革蘭氏染色原理：
G＋菌：細(xì)胞壁厚，肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性障，當(dāng)乙醇脫色時(shí)，肽聚糖脫水而孔障縮小，故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上。呈紫色。
Gˉ菌：肽聚糖層薄，交聯(lián)松散，乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮，其脂含量高,乙醇將脂溶解，縫隙加大，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁，沙黃復(fù)染后呈紅色。
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟，具體操作方法是：
1）涂片固定。在無(wú)菌操作條件下，用接種環(huán)挑取少量細(xì)菌于干凈的載玻片上涂布均勻，固定。
2）草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘。
3）自來(lái)水沖洗，去掉浮色。
4) 用碘-碘化鉀溶液媒染1分鐘，傾去多余溶液。
5）用中性脫色劑如乙醇或丙酮酸脫色，革蘭氏陽(yáng)性菌不被褪色而呈紫色，革蘭氏陰性菌被褪色而呈無(wú)色。
6）用蕃紅染液復(fù)染1分鐘，革蘭氏陽(yáng)性菌仍呈紫色，革蘭氏陰性菌則呈現(xiàn)紅色。革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌即被區(qū)別開。
為了研究細(xì)菌的形態(tài)，微生物學(xué)家發(fā)明了對(duì)細(xì)菌的染色，有用一種染色劑的稱單染，僅能對(duì)細(xì)菌形態(tài)觀察。用兩種以上的稱復(fù)染，革蘭氏發(fā)明了復(fù)染色法；先后用兩種染色劑和媒染劑、脫色劑組合，由此而命名為革蘭染色。
革蘭染色不僅可以觀察細(xì)菌的形態(tài)，同時(shí)將細(xì)菌分為兩大類。一類是染色陽(yáng)性菌是紫色，另一類染色陰性的是紅色。
由于細(xì)菌的結(jié)構(gòu)上的差異，形成了不同的染色效果。了解染色性能有助于臨床用藥和細(xì)菌的鑒定；
如青霉素對(duì)革蘭染色陽(yáng)性菌有效，當(dāng)化膿性細(xì)菌感染可首選藥物。而氟哌酸對(duì)革蘭染色陰性桿菌有效，如腸道病、腹瀉為常用藥。
當(dāng)從尿道培養(yǎng)出革蘭陰性雙球菌，可以作為淋病感染的重要指癥。如出現(xiàn)革蘭染色陽(yáng)性的葡萄球菌，又可作為金黃色葡萄球菌感染依據(jù)
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